植物phasiRNA是一類具有相位分布的次級小RNA,在玉米雄穗發(fā)育過程中具有重要作用,其產(chǎn)生途徑中關(guān)鍵基因的突變均影響花藥的正常發(fā)育。近期研究表明,24-nt phasiRNA前體(24-PHAS)在玉米幼嫩雄穗中分離的膜結(jié)合多聚核糖體上富集,但核糖體的結(jié)合模式及其在24-nt phasiRNA產(chǎn)生途徑中的作用仍不清楚。
核糖體結(jié)合在24-nt phasiRNA產(chǎn)生途徑中的作用模式
國家植物園(南園)張梅研究組近期對玉米雄穗9個關(guān)鍵發(fā)育階段的花藥和成熟花粉的核糖體圖譜進行分析,發(fā)現(xiàn)24-PHAS上廣泛存在核糖體結(jié)合,并且核糖體結(jié)合水平與24-PHAS表達動態(tài)相對應(yīng)。在不同的玉米自交系中,核糖體與24-PHAS的結(jié)合是保守的,核糖體結(jié)合傾向于發(fā)生在miR2275剪切位點的上游。為了探索核糖體結(jié)合的功能,研究人員首先鑒定了這些核糖體結(jié)合區(qū)域的短開放閱讀框(short open reading frames,sORFs),分析了這些sORFs翻譯成蛋白質(zhì)的可能性,發(fā)現(xiàn)大部分sORFs表現(xiàn)出類似蛋白質(zhì)編碼基因ORF的3-nt周期性特征,但質(zhì)譜分析卻未檢測到對應(yīng)的小肽。接著,研究人員對24PHAS_NO296位點的整個核糖體結(jié)合區(qū)域進行了敲除,發(fā)現(xiàn)no296突變體中核糖體不再與24PHAS_NO296前體結(jié)合,24-nt phasiRNA豐度顯著下降,說明核糖體結(jié)合促進了phasiRNA的產(chǎn)生??蒲腥藛T進一步通過編輯核糖體結(jié)合區(qū)域的sORF,使其形成新的sORF,發(fā)現(xiàn)核糖體結(jié)合仍然存在,并且該位點24-nt phasiRNAs的產(chǎn)生沒有明顯變化。這些結(jié)果表明,sORFs可能是通過促進核糖體與24-PHAS前體的結(jié)合,而非其翻譯的小肽,促進減數(shù)分裂期24-nt phasiRNA的大量產(chǎn)生。
該研究成果于近日在線發(fā)表于國際學(xué)術(shù)期刊Plant Cell,國家植物園(南園)助理研究員韓英佳、博士研究生姜思奇和沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)講師董小妹為該論文的第一作者,張梅研究員為通訊作者。南京農(nóng)業(yè)大學(xué)李盛本教授、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)吳劉記教授、斯坦福大學(xué)Virginia Walbot教授和加利福尼亞大學(xué)戴維斯分校Blake C. Meyers教授等也參與了該項研究工作。研究得到了中國科學(xué)院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項和國家自然科學(xué)基金等項目的資助。
植物發(fā)育與環(huán)境適應(yīng)的分子調(diào)控研究組
組長:張梅研究員
郵箱:mei.zhang@ibcas.ac.cn
主要研究方向:
以玉米為主要研究材料,開展生殖器官發(fā)育和高溫脅迫相關(guān)的分子機理研究。(1) 關(guān)鍵耐熱基因挖掘及分子機制解析;(2) 玉米雄穗發(fā)育的分子機理解析;(3) 分子設(shè)計育種。
編輯 | 韓藝
審核 | 梁鵬鴻
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